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Bioss標記服務|用標記豐富百家學科-北京博奧森生物技術有限公司
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Bioss標記服務|用標記豐富百家學科
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2020-5-11


服務內容

1、可接收的待標記樣品包含抗體IgG、大分子蛋白、小分子多肽、小分子化合物等。

2、可提供標記服務的標記物有:

A.酶標記物:堿性磷酸酶 (AP/ALP),辣根過氧化物酶 (HRP);

B.生物素 (Biotin);

C.常規熒光素:FITC,Rhodamine B (RBITC);

D.Cy系列熒光素:Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7;

E.Alexa Fluor 系列熒光素:AF350,AF488,AF555,AF594,AF647;

F.熒光蛋白:藻紅蛋白 (PE),別藻藍蛋白 (APC);

G.熒光雙標記:PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7;

H.膠體金標記Co-Au。

樣品要求

1、待標記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標記物結合的成分,如有特殊成分,請提前標注說明。

2、待標記樣品最小標記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應大于1mg/ml。

3、抗體IgG樣品中應不含BSA、疊氮鈉、甘氨酸等成分。

4、大分子蛋白應提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結構式。

收費標準

1、抗體和大分子蛋白標記收費標準(單位元):

注:ALEXA FLUOR 系列染料是由美國生命技術公司 (Life Technologies)旗下的分子探針公司 (Molecular Probes)開發的專利熒光染料,我公司已經購買授權,可用于商務標記。

2、小分子多肽和化合物因為分子量較小,標記和純化需要特殊處理,價格和標記周期根據樣品的特性而定。

注意事項:

1、除了HRP的質量外,所要標記的抗體也要活性高、效價高、純度高、親和力好、這是保證標記物活性的首要條件。

2、標記物的保存條件,建議以儲存液形式保存,濃的標記物相對穩定,通常加入30~40%甘油于-20℃以下保存1~2年,但稀釋后,只能保存數周。故應用液應在12小時內用完,切忌反復凍融。


標記物介紹

堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP或AP)是免疫診斷試劑產品最常用的標記酶之一,優點是穩定性高、靈敏度高。ALP是一種能夠將對應底物去磷酸化的酶,即通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團的過程被稱為去磷酸化或脫磷酸化。堿性磷酸酶是磷酸酶的一種,磷酸酶的作用與激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如ATP,將磷酸基團加到對應底物分子上。

辣根過氧化物酶 (Horseradish Peroxidase,HRP)活性高,穩定,分子量小,純酶容易制備,所以最常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為PH3~9,酶催化的最適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下飽和度硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白最大吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ (德文ReinheitZahl)表示酶的純度。高純度的酶RZ值應在3.0左右(最高可達3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。

FITC和RhodamineB (RBITC)是常見的熒光素,性質較穩定。

Cy系列熒光染料由于熒光較強,對光猝滅有抵抗力而熒光不宜消退,近年來應用比較廣泛。

ALEXA FLUOR®系列染料是由美國生命技術公司 (Life Technologies)旗下的分子探針公司 (Molecular Probes)開發的系列熒光染料,其激發光和發射光光譜覆蓋大部分可見光和部分紅外線光譜區域,應用廣泛。以高亮度、穩定性、儀器兼容性、多種顏色、pH值不敏感以及水溶性為主要特點。Alexa Fluor染料在一個廣泛的pH范圍內保持強熒光。

PE和APC是從海藻中分離純化的,目前普遍使用的新型熒光標記試劑。在特定波長激發下,藻膽蛋白能發射強烈的熒光,其熒光強度是熒光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子產率,在可見光譜區有很寬的激發及發射范圍。

PE和Cy熒光染料可以組合成熒光很強的共軛染料,它的特點是可以在較低的光譜下被激發(通常是488nm),同時也可以在Cy熒光染料對應的光譜下被激發,這有利于流式檢測時做更多的熒光組合。

生物素(Biotin),又名維生素B7或維生素H,是噻吩與尿素相結合的駢環化合物,帶有一戊酸側鏈,有α,β兩種異構體。生物素是羧化酶的輔基,在體內參與CO?的固定和羧化反應。生物素可以用作核酸探針的標記物,它能與核酸分子的UTP或dUTP5‘位上的C相結合,并可與親和素結合而被檢測。在檢測的過程中,生物素只用作固定連接,而不用作信號檢測。

膠體金是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能利用到。
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